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ReadyAMP®PCR直接擴(kuò)增技術(shù)應(yīng)用在油菜葉中的流程
更新時(shí)間:2024-09-13   點(diǎn)擊次數(shù):166次

ReadyAMP®PCR直接擴(kuò)增技術(shù)應(yīng)用在油菜葉中的流程

基因工程油菜作為全球種植面積增長(zhǎng)最快的作物廣受科學(xué)家的關(guān)注。而油菜籽擁有豐富的油脂含量,使得油菜成為一種十分重要的油料作物。常見(jiàn)的轉(zhuǎn)基因油菜方向包括品種改良、抗病、抗蟲(chóng)、抗除草劑等,想要獲得一系列優(yōu)良品種,則需要面對(duì)大量待篩選葉片。目前實(shí)驗(yàn)室提取基因組DNA的技術(shù)手段很多,例如CTAB法、離心柱提取法。但是以上方法操作步驟多、費(fèi)時(shí)費(fèi)力、效率極低,大大降低了實(shí)驗(yàn)室研究人員的積極性。一旦遇到田邊采樣,還面臨著采樣周期,快遞回實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)等長(zhǎng)周期檢測(cè)過(guò)程,無(wú)法做到即采即做。

從經(jīng)濟(jì)角度考慮,目前應(yīng)用于油菜葉片中提取基因組DNA的方法主要為CTAB法。該方法局限性很大,例如油菜葉取材量大、步驟多、離心步驟多、使用某些有毒有害試劑,且無(wú)法高通量操作。隨著田邊診斷的推進(jìn),加上逐年增加的油菜葉檢測(cè)量,傳統(tǒng)方法已經(jīng)不能滿足實(shí)驗(yàn)室需求,我司開(kāi)發(fā)的ReadyAMP®油菜葉直接PCR擴(kuò)增試劑盒能夠快速、精準(zhǔn)檢測(cè)到目的基因。此方法優(yōu)點(diǎn)如下:

—對(duì)樣本量要求不高

—操作簡(jiǎn)單快速

—不用液氮研磨

—不用離心

—不使用蛋白酶和有毒有害有機(jī)試劑

 

案例A 油菜葉片擴(kuò)增12對(duì)基因

圖片1.png

圖片2.png

 

RL:油菜葉片  +:植物基因組試劑盒提取基因組(20×) —:陰性對(duì)照

取油菜葉3mm,直接置于ReadyAMP®油菜葉片直接PCR擴(kuò)增試劑盒(貨號(hào)Nu-RAR01)中,擴(kuò)增12個(gè)不同長(zhǎng)度基因,用植物基因組提取試劑盒(貨號(hào)Col-D04)提取基因組為對(duì)照(基因組20×稀釋)。

 


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